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O presente estudo teve por objetivo avaliar parâmetros de motilidade e viabilidade in vitro na diluiç?o do crioprotetor dimetilformamida a 5% pós-descongelaç?o para concentraç?es de 2,5 e 1,25%, mediante utilizaç?o de dois diluentes comerciais adicionados junto ao s?men de eqüino criopreservado. Após a descongelaç?o as amostras foram diluídas com a finalidade de manter as concentraç?es finais (2,5 e 1,25%) de crioprotetor, utilizando-se dois diluentes comerciais (FR4® e Botu-Crio®) em dois tempos: inicial (Ti) e final (Tf). Foram utilizadas 13 amostras de ejaculados distintos de cinco garanh?es de raças nacionais. Os parâmetros de motilidade foram observados através da análise computadorizada e os de integridade de membrana plasmática pela microscopia de epifluoresc?ncia. Verificou-se melhora nos parâmetros de motilidade total e progressiva dos espermatozóides, no tempo final (P 0,05, entre os tratamentos quanto ? a integridade de membrana plasmática.